Tại sao các tế bào có thẩm quyền phải được giữ trong băng?

2024 Tác giả: Fiona Howard | [email protected]. Sửa đổi lần cuối: 2024-01-10 06:44

Giữ chúng LẠNH! Quá trình tạo ra các tế bào có thẩm quyền đang gặp nhiều thách thức do các tế bào cần phải giữ lạnh. Điều này rất quan trọng vì các tế bào rất nhạy cảm và mỏng manh trong khi chúng đang được tạo ra có thẩm quyềnGiữ nhiệt độ thấp giúp tránh tế bào chết trong quá trình chế biến.

Tại sao các phản ứng lại bị đóng băng trong quá trình thí nghiệm biến hình?

Sau đó, hỗn hợp plasmid-tế bào được làm nóng một thời gian ngắn đến 45–50 ° C, cho phép DNA xâm nhập vào tế bào qua màng bị gián đoạn. Sau đó, hỗn hợp được làm nóng được đặt trở lại trên nước đá để giữ lại các plasmid bên trong vi khuẩn … Nếu dung dịch DNA plasmid có quá nhiều muối trong đó, hiện tượng phóng hồ quang có thể xảy ra, làm ảnh hưởng đến quá trình biến đổi.

Tại sao bạn đặt các ống trên đá?

Bạn nghĩ tại sao chúng tôi đặt các ống trên băng? Để đưa DNA vào vi khuẩn, chúng ta phải chọc các lỗ trên chúng bằng hóa chất clorua canxi (CaCl2). … Các lỗ được chọc ra để cho phép DNA trong lá vi khuẩn bị rò rỉ. Nếu chúng ta không giữ chúng trên băng, chúng sẽ 'chảy máu' đến chết.

Vai trò của clorua canxi đá lạnh trong việc chuẩn bị các tế bào có thẩm quyền là gì?

Quá trình biến đổi sốc nhiệt canxi clorua khuyến khích các tế bào vi khuẩn hấp thụ DNA từ môi trường xung quanh. … Dung dịch CaCl2 lạnh như đá tạo điều kiện thuận lợi cho việc liên kết DNA với bề mặt của tế bào, sau đó xâm nhập vào tế bào sau một thời gian ngắn bị sốc nhiệt (3).

Bạn lưu trữ các tế bào có thẩm quyền như thế nào?

Tế bào có thẩm quyền nên được bảo quản ở- 80 ° C. Bảo quản ở -20 ° C sẽ làm giảm đáng kể hiệu suất biến nạp (TE). Khi thử nghiệm trên NEB 5-alpha Competent E. coli (NEBC2987H), các tế bào đã mất 94,5% TE chỉ sau 24 giờ lưu trữ ở -20 ° C.