Cách tốt nhất để tách lục lạp ra khỏi bộ đệm là gì?

2024 Tác giả: Fiona Howard | [email protected]. Sửa đổi lần cuối: 2024-01-10 06:44

Để có thể chiết xuất các sắc tố, lục lạp được treo trong một bộ đệm cách ly. Để có thể tách các sắc tố ra khỏi lục lạp, trước hết chúng ta phải loại bỏ chất đệm. Cách tốt nhất để tách lục lạp ra khỏi bộ đệm là gì? sử dụng máy ly tâm để tách

Làm cách nào để cô lập lục lạp?

Trong phương pháp phân lập lục lạp, vách tế bào bị phá vỡ cơ học bằng máy xay hoặc máy đồng hoá. Sau đó, các mô lá chưa bị phá vỡ và các mảnh vụn tế bào được loại bỏ bằng cách lọc. Lục lạp được thu thập bằng cách ly tâm sử dụng gradient percoll.

Bạn tạo bộ đệm cách ly lục lạp như thế nào?

Chuẩn bị lượng cần thiết của đệm Cách ly 1X Lục lạp bằng cách pha loãng kho đệm 2X 1: 1 với nước dH2OThêm 10 µL dung dịch BSA 10% cho mỗi mL 1X Lục lạp Bộ đệm cách ly. Ngay trước khi sử dụng, thêm 1 µL DTT trên 1 mL đệm cách ly lục lạp. Gắn nhãn vùng đệm này là 'Bộ đệm hoàn chỉnh'.

Có gì trong bộ đệm cách ly lục lạp?

đệm phân lập DNA bao gồm 100 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl (pH 8,0), 50 mM EDTA và 1 mM DTTDung dịch kiềm lục lục được thu được bằng cách ủ viên lục lạp với 8 ml dung dịch đệm phân lập DNA, 1,5 ml 20% SDS, 20 µl 2-Mercaptoethanol và 30 µl Proteinase K (10 mg / ml) vào ống ly tâm ở 55 ° C trong 4 giờ.

Độ pH của dung dịch đệm được sử dụng để đồng nhất hóa lá rau bina trong quy trình phân lập lục lạp là bao nhiêu?

Rau bina chứa nhiều lục lạp tốt và chúng phân lập dễ dàng. Bạn sẽ phải cho lá vào máy xay lạnh với dung dịch đệm phosphate 0,1 M, pH 7,5và 0,5 M sucrose để giữ cho chúng không bị vỡ.